醫(yī)療器械的細.菌內(nèi)毒素檢驗

細.菌內(nèi)毒素檢查法是利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細.菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細.菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。

一、細.菌內(nèi)毒素簡介

細.菌內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細胞壁外膜中的一種組分，主要成分是脂多糖，后者由細.菌細胞壁合成后轉(zhuǎn)運到細胞表面，細.菌死亡或自溶后會從細.菌細胞結(jié)構(gòu)中釋放出來，能導致人體發(fā)熱、休克甚至死亡。革蘭陰性菌的典型菌群有大腸桿菌、傷寒桿菌、淋球菌、腦膜炎球菌、志賀菌、結(jié)核桿菌，痢疾桿菌等。這類菌群的致熱性除全菌體和胞壁中所含的肽聚糖外，突出的是其胞壁中所含的內(nèi)毒素。所以，內(nèi)毒素是革蘭陰性菌的主要毒力因子。

二、細.菌內(nèi)毒素檢測方法介紹

目前細.菌內(nèi)毒素檢測包括兩種方法，即凝膠法和光度測定法，后者包括濁度法和顯色法。

1.濁度法

此方法是通過利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)發(fā)生濁度變化測定內(nèi)毒素的含量。基于此試驗原理，可以分為終點濁度法和動態(tài)濁度法。終點濁度法是基于內(nèi)毒素濃度與反應(yīng)混合物在培養(yǎng)一段時間后的濁度（吸光度或透光率）的量化關(guān)系。動態(tài)濁度法是測定反應(yīng)混合物達到預(yù)定吸光度或透光率需要的時間（初動時間）或濁度增加的速度的方法。進行此實驗時需要在鱟試劑生產(chǎn)商建議的培養(yǎng)溫度下進行（通常是37 ±1℃）。

2.顯色法

此方法是一種通過測定鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)產(chǎn)生的縮氨酸釋放出的顯色基團的來進行試驗的方法。 基于以上特殊的試驗原理，此方法可以分為終點顯色法與動態(tài)顯色法。終點顯色法是基于內(nèi)毒素的濃度與孵育結(jié)束時所釋放的顯色基團的量化關(guān)系的一種試驗方法。動態(tài)顯色法是測定反應(yīng)混合物達到預(yù)定的吸收度所需要的時間或其顏色增長的速度。進行此實驗時需要在鱟試劑生產(chǎn)商建議的培養(yǎng)溫度下進行（通常是37±1℃）。

三、微生物學檢測標準

GB/T 14233.2-2005 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第2部分：生物學試驗方法

2015年版《中國藥典》1143 細.菌內(nèi)毒素檢查法